RNA回收和浓缩，小体积洗脱

• 有效回收酶反应RNA

• 可浓缩少量RNA至10 μl

• 可回收不同方法纯化的RNA

• 15分钟即可获得高品质RNA

RNeasy MinElute Cleanup Kit使用基于硅胶膜技术的特制RNeasy MinElute离心柱，可回收并浓缩来自于酶反应体系或其他样本中的RNA。该试剂盒还可用于RNA样本脱盐。可以将至多45 μg的RNA纯化至10 μl的体积中。整个纯化流程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上自动完成。

高效去除real-time RT-PCR抑制剂。

不进行回收，抑制剂会导致real-time定量时RNA量被低估。采用酸酚法从HeLa细胞中分离总RNA，并使用或不使用RNeasy MinElute Cleanup Kit进行回收。使用图示体积的RNA洗脱液，按图“RNA浓缩”中所述进行real-time RT-PCR。利用获得的C_T值计算RNA量。

Performance

RNeasy MinElute Cleanup Kit可纯化高品质总RNA，无杂质或酶抑制物，其A ₂₆₀ /A₂₈₀比值为1.9–2.1（参见"High-quality RNA"） 。相当于少于一个细胞的RNA的量（少至1 pg）也可以被浓缩（参见"Concentration of RNA"）。可以纯化大量的RNA（至多45 µg），适用于敏感的分析（参见"Reliable cleanup of RNA"）。在下游应用中可采用小量反应体积，确保提高反应效率。该试剂盒可获得高纯度的RNA，可使更多的样本用于反应中，且无抑制作用（参见"Efficient removal of real-time RT-PCR inhibitors"）。

Principle

RNeasy MinElute Cleanup Kit专为从酶反应（如标记、体外转录）中纯化和浓缩RNA而设计，通过乙醇沉淀和有机提取方法分离RNA，并使RNA样本脱盐，浓缩硅胶膜操作流程制备的RNA（如，PAXgene Blood RNA制备）。RNeasy技术结合异硫氰酸胍裂解和硅胶膜纯化，简化了总RNA纯化技术。

Procedure

异硫氰酸胍裂解缓冲液和乙醇加至样本中，创造促进RNA选择性结合到RNeasy MinElute膜上的条件。然后将样本上样到RNeasy MinElute离心柱。RNA结合到硅胶膜上，污染物被高效洗去，用水洗脱得到高品质RNA。

同步回收和浓缩酶反应产物或粗RNA制备样本，可在15分钟内完成。相较而言，尤其是从小样本中，耗时的乙醇沉淀浓缩和回收会导致RNA损失。RNeasy MinElute操作流程比真空离心更快，仅离心而无需脱盐和去除其他杂质样本。RNeasy MinElute离心柱独特的设计确保将纯化得到的RNA浓缩至10 µl，用于生物芯片分析和real-time RT-PCR等下游应用。整个纯化流程可在QIAcube全自动核酸纯化仪上全自动进行。

Applications

RNeasy MinElute技术纯化得到高品质RNA，适用于各种下游应用，包括：

• Northern印迹、点印迹和狭缝印迹

• 终点法RT-PCR

• 定量real-time RT-PCR

• 芯片分析

• Poly A⁺ RNA筛选