UniRed核酸染料(10,000×水溶液)

 

UniRed核酸染料特点:

无毒性:UniRed 独特的油性和大分子量特点决定其不能穿透细胞膜进入细胞内,所以无毒。实验证明,该染料的诱变性远远小于EB

灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I

稳定性高: 适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。

信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。

操作简单:与 EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗 ,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。

适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNAssDNA RNA 染色。

EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置:标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。但是UniRed不能被488 nm氩离子激光器或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。对于此类装置,我们推荐您使用UniGreen,它和SYBR Green I的光谱相似,灵敏度相当,但更加稳定。

UniRed核酸染料的使用方法

1.胶染法(用法同EB

1) 制胶时加入UniRed 核酸染料(例如:每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL UniRed 10,000× 储液,以此比例类推)。

2) 按照常规方法进行电泳。

注意事项:

此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做10050mL的胶。

由于UniRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将UniRed储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。UniRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。

含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备,并长期保存直到使用。

此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

2.泡染法

1) 按照常规方法进行电泳。

2) 用H2OUniRed 10,000× 储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成染色液。(例如将15μL UniRed 10,000× 储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。

3) 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.510%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30min1h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。

注意事项:

用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。

3× UniRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。

如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。

特别提醒:

如果您使用的是紫外成像仪,请选择UniRed;如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测,请选择UniGreen

在极少数情况下,质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。

 

货号

产品描述

规格

Uni0500

UniRed核酸染料(10,000× 水溶液)

500 μL